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细胞提RNA可以用12孔板吗
怎样解决RAW264.7转染效率低的问题 ?
答:
其实RAW264.7
细胞
转染效率低怎样提高转染效率一直是困扰实验者的一道难题,特别对于比较大的质粒DNA的转染更是困难;我们实验室用Zeta Life Advanced DNA
RNA
AD600075转染raw 264.7细胞整理了一套优化方案希望对大家转染raw 264.7细胞提高转染效率有一定的帮助。下图是在6
孔板
转9000bp左右的pcDNA3.1-GFP...
如何作QPCR的标准曲线
答:
模板有基因组的污染:
RNA提取
过程中避免基因组DNA的引入,或通过引物设计避免非特异扩增。6.扩增效率低反应试剂中部分成分特别是荧光染料降解。反应条件不够优化:可适当降低退火温度或改为三步扩增法。反应体系中有PCR反应抑制物:一般是加入模板时所引入,应先把模板适度稀释,再加入反应体系中,减少抑制物的影响。7.同一...
如何作QPCR的标准曲线
答:
作QPCR的标准曲线
可以用
PCR-ELISA法作。具体如下:PCR-ELISA法:利用地高辛或生物素等标记引物,扩增产物被固相板上特异的探针所结合;再加入抗地高辛或生物素酶标抗体-辣根过氧化物酶结合物,最终酶使底物显色。常规的PCR-ELISA法只是定性实验,加入内标,作出标准曲线,也可实现定量检测目的。通过测定...
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