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–80℃里的甘油菌液怎么复苏
甘油
LB是
怎样
配制的(
菌液
冻存预混液)?
答:
是做超低温保存
甘油
管吧,首先是甘油和LB分别灭菌,灭菌后,LB无菌接种保存
菌
,培养时间结束后,培养
液
与甘油体积比1:1混合。
菌液里面
有少量
甘油
会影响测序结果吗
答:
不会影响,因为测序会首先将你送的菌株进行活化扩大培养,然后抽提出你的质粒,然后用质粒作为模板去测序的,所以只要你的菌株他们能够摇出来,就可以测序。
甘油
管冷冻保藏方法总结
答:
2、只需将培养好的菌株接入溶液中,摇匀成菌悬液,细胞即吸附于小珠上,然后吸出溶液,将保藏管置-70
℃
可保存10年,置-10℃至-15℃可保存1-3年。三、甘油管保藏与活化:在做一丝状真菌
的甘油
管保藏(-
80
度超低温保存,以甘油做保护剂)。是将菌在液体摇瓶中培养后将
菌液
与甘油混合、将固体...
细菌冻存
液如何
取用,直接拿来用,剩下的还可以放负
八十
冻存吗?取用...
答:
按正常的比例接种到新的培养基中即可,
甘油
不会影响细菌培养。如果你对操作有信心,在吸取冻存
的菌液
的时候不会污染就可以继续冻存,建议做个标记。最好是重新接种后的菌液再保存一次,因为通常来说-
80℃
保存时间是一年。重新存过可以增加菌种保存时间。
标准菌株
怎样
保存?最适合的温度是多少?
答:
可使用冻干保藏、利用多孔小珠(磁珠)在-70
℃
保藏或使用液氮保藏等方法。菌株不同保藏方法也不尽相同,应根据文献资料选择最佳保藏方法。对于从标准
菌种
冷藏中心或经ISO9000 质量管理体系认证或其它有效的认证的商业机构获得原包装的质控菌株,
复苏
和使用应按照制造商提供的使用说明进行。
不同细菌感受态制备方式相同吗
答:
2. 次日从5ml LB培养物吸取200μl转入50ml LB培养基中(250ml 锥形瓶),37
℃
,250rpm培养2小时,此时OD600约0.4—0.5。 感受态细胞的制备:3. 吸取1ml
菌液
到1.5ml离心管里,5000rpm离心5分钟,弃去上清。 4. 加入100μl预冷的Solution A,悬浮菌体,冰浴30分钟。 5. 此时感受态细胞...
标准菌株
怎样
保存?最适合的温度是多少?
答:
-
菌液
的浓度:菌液浓度越大,菌种保存时间越长。保藏时常使用细菌悬液,霉菌常用无菌水或生理盐水制备的孢子悬液。- 甘油浓度:甘油终浓度通常设置为10%~20%。由于甘油原液过于粘稠,需要配制适宜
的甘油
-水溶液。- 保藏时注意慢冻快化,冷冻时降温速率保持在1
℃
/min,
复苏
时使用37℃水浴融化,以...
甘油如何
冷藏细菌,具体的操作步骤是什么?希望能分条列出来.
答:
1、配制30%(体积分数)
的甘油
水溶液,离心管若干 灭菌备用.2、将细菌用富集培养基摇瓶培养过夜,根据保藏要求(有些要求高的项目中菌要达到一定OD值)培养.3、将
菌液
和灭菌的甘油水溶液按照2:1的体积比例在离心管中混匀(使最终甘油浓度为10%,其实甘油多点也没关系),-70°冰箱保存.
甘油
冻存管保存
菌种
,生孢需不需要加液体石蜡油隔绝空气?如果需要取出 ...
答:
不需要。甘油冷冻管藏法,其本身就是利用微生物在甘油中生长和代谢受到抑制的原理达到保藏目的。甘油保存菌种:取需要的
菌种的菌液
与百分之
八十
灭菌之后
的甘油
按照菌液:甘油=5:2的比例混合,零下七十度保存(零下二十度保存时间较短)。甘油保存菌种:取需要的菌种的菌液与百分之八十灭菌之后的甘油按照...
菌种
保藏于-20
摄氏度
要用
甘油
吗?
答:
用,
甘油
主要作用是保护细胞不被冻裂。
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