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trizol冻起来的细胞再提rna
如何从
冻
存
的细胞提取RNA
十万火
答:
1). 将
冻
存管从液氮或冰箱中取出;2). 不待
细胞
溶解,将
Trizol
500ul-1ml直接放入冻存管中,此时Trizol会冻成冰状;3). 将冻存管缓慢融化,并用加样器吹打混匀;4). 将细胞裂解液移至Eppendorf管中,16000′g离心1min,吸出管底絮状沉淀;注释:该步骤并非必要,多数Protocol省略该步骤,但加入...
RNA提取
(
Trizol
法)
答:
100 mg叶片配1 ml
TRIZOL
,时间把控在1分钟内,以保持
RNA
活性。动物组织</: 猪肝脏提取时,取新鲜或
冷冻
组织,每30-50 mg组织(50mg为常用量)配1 ml TRIZOL,利用匀浆仪处理,确保样品体积不超过TRIZOL体积的10%。
细胞提取
</: 单层培养细胞收集时,不论是直接裂解还是胰蛋白酶处理,都需注意细胞...
动物
细胞冻
干后可以
提取rna
吗
答:
总
RNA提取
试剂盒(
TRIzol
法) RIpure试剂是直接从
细胞
或组织中提取总RNA的试剂。它破碎和溶解细胞时能保持RNA的完整性。加入氯仿后离心,样品分成水样层和有机层。RNA存于水样层中。收集上面的的水样层后,RNA可以通过异丙醇沉淀来还原。
想请教用过
Trizol
法
提取RNA
,且结果比较理想的详细步骤及注意事项,是 ...
答:
贴壁
细胞
的话去培养液,PBS洗一遍,加
Trizol
吹打下来。组织的话,在液氮里面捣碎,然后粉末放进Trizol,用超声粉碎器粉碎(超声每3秒,停10秒冷却,直到看不见组织碎末)。(此步骤可以-80oC冻存,下面可以以后再做)每1毫升Trizol加200微升氯仿(氯仿需饱和,可以在氯仿加一两公分高的水层,摇晃后静置...
求
TRIZOL提取RNA
的详细步骤
答:
1、在提取组织RNA时,每50~100mg组织用1ml Trizol试剂对组织进行裂解;
提取细胞RNA
时,先离心沉淀细胞,每5-10 ╳106个细胞加1ml Trizol后,反复用枪吹打或剧烈振荡以裂解细胞。2、将组织或
细胞的Trizol
裂解液转入EP管中,在室温15~30C下放置5分钟;在EP管中,按照每1ml
TRIZOL
加0.2ml氯仿的量...
加完
trizol
后的材料保存在-80度,要
提rna
如何解冻?是在冰上还是要37度...
答:
在冰上解冻哈,如果直接37度水浴的话会破坏
RNA
的结构。
提取RNA
相关
答:
因为
提取
的组织,在加入
Trizol
后增加了一步简短的离心,可以帮助去掉一些无法降解的组织,比如纤维和杂质之类,然后取上清再加入氯仿,可以帮助提高氯仿的效率。然后就是在加入 Trizol 后,可以将裂解液放到-80 冻存半小时以上,据说冻融过程中可以
再次
帮助更加充分的裂解
细胞
,分离蛋白和
RNA
。我试了一...
trizol
法
提取
答:
1.
Trizol
法在
提取RNA
时,首先将Trizol试剂加入样品中,该试剂能够同时保持RNA的完整性并破坏
细胞
以及溶解细胞成分。2. 随后,通过加入氯仿并进行离心处理,样品中的裂解液会形成水相和有机相两层。RNA主要存在于水相中。3. 将水相转移至新管中,并通过加入异丙醇使RNA沉淀以便进行回收。4. 去除水相后...
Trizol
法怎么
提取
高质量
RNA
答:
RNA的提取
(仅供参考)准备试剂:氯仿,异丙醇,75℅乙醇,无RNase的水或0.5℅SDS(溶液均需用DEPC处理过的水配制)操作步骤:1. 匀浆处理:a. 组织 将组织在液氮中磨碎,每50-100mg组织加入1ml
TRIzol
,用匀浆仪进行匀浆处理。样品体积不应超过TRIzol体积10℅。b. 单层培养
细胞
直接在培养板中加入...
提rna
步骤
答:
提rna
步骤:1、样本前处理。2、室温静置5分钟,让RNA可以充分释放。3、按 1 mL
Trizol
加入 200 μL 氯仿,盖好管盖。用手剧烈震荡 15秒,室温放置 3分钟。4、12000 g、4℃离心 15分钟。5、小心转移上清液(约500 μL)至新的 1.5 mL 无酶离心管中。6、加入等体积异丙醇,室温静置10分钟...
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