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mirna荧光素酶报告基因原理
如何预测和鉴定
miRNA的
靶
基因
答:
用一些预测软件,例如TargetScan、miRDB等。可以同时使用几个软件预测,挑选出重叠的靶标,进行靶标验证。一般预测的靶标都是3'UTR区有结合位点,因此通常使用双
荧光素酶报告
实验来证明是否真的是直接靶标。然后通过mimics、inhibitor处理,发现靶标确实发生了相应的变化则证明为直接靶标。
关于
miRNA
你知道多少?
答:
miRNA qPCR检测:定量分析样本中特定
miRNA的
差异表达情况。 载体构建:定制microRNA过表达或抑制载体,以研究其生物学效应。 靶位点预测与
荧光素酶
载体构建:揭示miRNA潜在的靶
基因
,评估其功能影响。 转染后表达检测:包括细胞培养实验和分子生物学方法,全面揭示miRNA作用的动态。想了解更多详细信息,欢迎...
构建
miRNA荧光素酶报告基因
载体
答:
pGL3-basic是检测启动子的
荧光报告
载体,当然是将miR的启动子序列构建上去。内切酶按照你
基因
和多克隆位点的序列来选择。
如何筛选目的
基因
的
miRNA
答:
你指的是寻找
miRNA的
靶
基因
位点吗?一般都是利用生物信息学软件进行预测,但这种预测都是有局限性的,比如miRNA可能会与靶基因之间产生错配,这样会丢失一些靶基因,另外预测的都未经过实验的验证,还需要进行实验的验证来去伪存真。当然植物可以使用降解组测序的方法来进行靶基因预测,
原理
就是植物中miRNA...
如何用
荧光素酶报告
系统筛选microRNA,求推荐paper
答:
这个SNP位点在种子区,推测也具有一定功能。第一步想克隆microRNA到表达载体,同时克隆3’-UTR区(包括野生型和突变型)到PGL-3 control 荧光素酶
基因
下游,双转细胞后,利用
荧光素酶报告
系统检测两者是否结合,snp位点是否影响结合。请问具体的实验设计:1.选取什么细胞系进行实验,是靶基因和
miRNA
内源...
为什么
荧光素酶
互补实验结果阴性也有
答:
双
荧光素酶
的阴性 首先这项检测技术对于
miRNA
与mRNA靶向结合位点验证是非常适用的。但苦恼的是在检测lncRNA/miRNA或circRNA/miRNA时常为阴性的结果。主要的原因有:(1) 生物信息学预测得到的潜在结合位点单一。通常一个miRNA会靶向多个靶
基因
,或与lncRNA/circRNA存在多个结合位点。同时,由于各预测数据库...
microrna干扰,与传统rnai相比有何优势
答:
这个SNP位点在种子区,推测也具有一定功能。第一步想克隆microRNA到表达载体,同时克隆3’-UTR区(包括野生型和突变型)到PGL-3 control 荧光素酶
基因
下游,双转细胞后,利用
荧光素酶报告
系统检测两者是否结合,snp位点是否影响结合。请问具体的实验设计:选取什么细胞系进行实验,是靶基因和
miRNA
内源表达...
怎样使用生物信息学方法预测调控
基因
的 microrna
答:
利用生物信息学方法预测靶基因,一般数据库会通过基因的3'-UTR是否存在和
miRNA
互补配对的碱基序列进行判断。鉴定方法
荧光素酶报告基因
检测,westernblot等。
微生物侵染属于什么技术
答:
miR21已知的靶基因是PTEN, RECK,SPRY1, RHOB,通过多个数据库预测并结合
荧光素酶报告基因
实验,发现miR21的新靶基因RASA1。5.具核梭杆菌处理激活CRC细胞TLR4/ MYD88/ NFkB通路 具核梭杆菌和PBS分别分别处理HCT118实验表达谱芯片分析基因表达变化,KEGG 和 Reactome通路分析TLR4/MYD88/NFkB通路显著富集...
一篇SCI一区Top,需要多少钱?
答:
生信分析给外包公司操作,需要15k;人员等杂费60k肯定有的(当然有些单位工资很低),至少得养1个博士、1个硕士吧,加上其他差旅费等杂费。
荧光素酶报告
实验证明miRNA和lncRNA有结合,靶
基因
mRNA和
miRNA的
结合,成本30k。相关信息 ISI通过其严格的选刊标准和评估程序挑选刊源,每年略有增减,从而做到SCI...
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