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dna裂解液配方
基因组DNA
提取中细胞
裂解液
怎么
配制
答:
主要根据不同的目的,裂解液的组成有所不同,
主要有提取核酸和蛋白两中.在提取RNA或DNA时
,我们主要是要充分裂解细胞,得到更多的核酸;如果我们的目的是蛋白,那要根据蛋白的位置、特性等因素考虑裂解液,在提取蛋白后,再根据实验需要复性蛋白等.以下是细胞裂解中常用试剂和其作用:50 mM Tris-HCl pH 7.4...
您好,您能告诉我答案吗?提取口腔黏膜脱落细胞中
DNA时
用到的
裂解液
是什 ...
答:
一般细胞裂解液的成分如下(用于提取DNA,如果要提取蛋白质,不建议使用SDS,
而是用TritonX-100):50mmol/L Tris-HCl (缓冲液
,保证细胞裂解时PH值也能稳定。Tris是一种有机碱)1.0 mmol/L EDTA (金属螯合剂)150 mmol/L NaCl (电解质,用于协调细胞膜内外离子平衡)0.1% SDS (十二烷...
...提取口腔黏膜脱落细胞中
DNA时
用到的
裂解液
是什么成分?谢谢您!_百度...
答:
1. 去污剂:用于破坏细胞膜的脂质双分子层
,从而裂解细胞;2. 蛋白酶抑制剂:用于溶解蛋白质,保持DNA的完整性;3. 缓冲剂:维持适宜的pH值,以稳定裂解过程中的环境;4. 离子盐:如NaCl,调节细胞内外离子平衡;5. 表面活性剂:如SDS(十二烷基硫酸钠),有助于溶解细胞膜和蛋白质。裂解液的具体...
分子实验查漏补缺系列:SDS碱
裂解
法制备质粒
DNA
视频时间 25:24
提真菌
DNA时
需要缓冲液和
裂解液
,但我查不到如何配,就是具体加Tri-Hcl...
答:
这是我提真菌
DNA
做ITS时用的提DNA方法:1M Tris-cl(PH 8.0)100 ml:12.11g Tris碱;ddH2O ,80ml;HCl,4.9 ml三者混匀充分溶解后,滴加浓盐酸调PH至8.0,定容至100ml;0.5M EDTA(PH 8.0) 100ml:在80ml水中加入18.01g EDTANa2.2H2O搅拌溶解,用NaOH调PH至8.0(约2gNaOH颗粒)...
如何
配制
lysis buffer要用来提取植物
DNA
答:
裂解缓冲液:抽提
裂解液
(PH 8.0):1L 0.1M Tris-HCl(12.44 克);1.4M NaCl(81.816 克);0.02 M Na2EDTA(7.45 克);2% CTAB(20 克);0.1% DIECA(1 克);2% PVP K-30(20 克)加 0.2%β-巯基乙醇后调 PH 值至 8.0....
细菌总
DNA
提取中,细胞
裂解液
怎么
配制
答:
细胞
裂解液
的主要目的:1.利用去污剂破坏脂质双分子层,破裂细胞;2. 溶解蛋白;3. 蛋白变性使其稳定;4. 抑制蛋白酶活性 推荐RIPA buffer:. 50 mM Tris-HCl pH 7.4 缓冲体系 · 150 mM NaCl 等渗体系 · 1 mM PMSF 强大的蛋白酶抑制剂 · 1 mM EDTA 变性剂和稳定剂 · 5 µg/...
分子实验查漏补缺系列:SDS碱
裂解
法制备质粒
DNA
答:
d) 加入200μL新鲜
配制
的碱
裂解液
II于每管细菌悬液中,盖紧管口,轻柔颠倒离心管5次,确保离心管的整个内壁均与碱裂解液II接触,以混合内容物,这个过程切勿振荡!之后将离心管放置在冰上。此步骤所用的碱裂解液II必须是新鲜配制,避免NaOH吸收空气中的CO2减弱了碱性,这也是很多商品化试剂盒的...
DNA
提取过程中的关键步骤及注意事项有哪些?
答:
一、
DNA
提取的完整步骤 :1. 取新鲜或冷冻样品的肌肉组织100ul-200ul或95%ALC保存的样品组织0.05g。 2. 将组织尽量剪碎,分别装入1.5ml 的离心管中。3. 每管中加入450ul的
裂解
缓冲液(10mM Tris-HCl pH8.0; 100mM EDTA, pH8.0)4. 每管加入10% SDS 50-100ul(70-80不定) (1-...
人血提取基因组1.基本原理是什么?2.步骤及试剂是什么
答:
轻轻吹打混匀;红细胞
裂解液
ELS
配方
: NH4Cl:4.15克加双蒸水500ml,取450ml; Tris:1.0297克加双蒸水50ml,再加上上面的450ml,共计500ml,高压灭菌, 用时加10-20ml 3.800-1000rpm离心5-8分钟,离心弃去上层红色清液; 4.收集沉淀部分,加入Hank’s液或无血清培养液离心洗2-3次; 5.如裂解不完全...
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