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SDSPAGE电泳缓冲液配方
如何使用高纯化凝胶
答:
非变性聚丙烯酰胺凝胶和变性
sds
-
page电泳
在操作上基本上是相同的,只是非变性聚丙烯酰胺凝胶的配制和
电泳缓冲液
中不能含有变性剂如
SDS
等。搜索 一般蛋白进行非变性凝胶电泳要先分清是碱性还是酸性蛋白。分离碱性蛋白时候,要利用低pH凝胶系统,分离酸性蛋白时候,要利用高pH凝胶系统。
做蛋白质的
sdspage电泳
为什么脱完色没有条带
答:
染色后,还需要脱色
液
(有乙醇、醋酸)脱色,不脱色的话全是蓝色,不能区分条带。脱色后,条带才能显示出来。在跑
SDS
-
PAGE
时,需要点Marker,正常情况在染色、脱色后能至少看到Marker的条带。如果Marker都没有,那就是
电泳
问题了。蛋白浓度不够、跑胶的时间过长或过短、仪器问题、正负极不要插反。
非变性凝胶
电泳
有什么特点?
答:
1. 凝胶的配置中非变性凝胶不能加入
SDS
,而变性凝胶的有SDS。2. 电泳载样
缓冲液
中非变性凝胶的不仅没有SDS,也没有巯基乙醇。3. 在非变性凝胶中蛋白质的分离取决于它所带的电荷以及分子大小,不像SDS-
PAGE电泳
中蛋白质分离只与其分子量有关。4. 非变性凝胶电泳中,酸性蛋白和碱性蛋白的分离是完全...
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