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酶切时间怎么算
双
酶切
37℃一般切多久
答:
切割的时间可以根据实验需要进行调整,但一般情况下,双酶切的反应时间为3-4小时
。这个时间足够限制性内切酶与目标DNA发生特异性的结合和切割反应。而对于某些特殊的酶或特定的实验要求,切割时间可能会有所不同。
tarkara
酶切
质粒
时间
答:
tarkara酶切质粒时间是四个小时。
酶切是根据酶切样品的量跟酶切体系中酶的活性来确定的
,是酶切PCR产物的话,跟你所加的保护碱基数目也是有关的。做酶切的时候加的酶都是过量的,切三四个小时,保证获得足够干净的载体,切载体时间太短的话,载体不容易纯化掉,就会混入到你的连接产物中影响连接效率...
双
酶切
37℃一般切多久
答:
双酶切的时间一般需要在37℃下进行3-4小时
。但请注意,具体的酶切时间会因实验条件、酶的种类和浓度、DNA的种类和浓度以及缓冲液的种类和浓度等因素而有所不同。在进行酶切反应时,应严格按照酶切反应的步骤和条件进行,以确保酶切反应的准确性和可行性。同时,对于具体的实验问题,建议咨询相关的实验...
Dpn1
酶切时间
答:
一般40min-1小时30分钟
双
酶切
一般切多长
时间
?
答:
一般情况下要3小时,最好保持在16度恒温下。
酶切时间是如何
确定?
答:
说明书,不同的说明书有
时间
推荐的,比如说是takara的酶,
酶切
的时间温度是37℃两个小时。
Bamh1的
酶切时间
是多少?
答:
Bamh1的
酶切时间
是 2-3小时。Bamh1是一种限制性内切酶。□ 起源 Bacillus amyloliquefaciens H □ 活性测定用底物 λ DNA □ 甲基化的影响 不受CG methylase、dam methylase、dcm methylase (根据识别序列的后续碱基) 的影响。□ Star活性 高甘油浓度、Mn2+存在、低离子强度条件下,识别序列会发生变化...
双
酶切
的20μL反应体系和反应
时间如何
确定?最好是说明原理。所用的...
答:
5ul 酶2 0.5ul buffer 去Takara产品目录查双
酶切
buffer表,按照那个倍数加,有时候需要BSA 水补足 20ul 30或37度,1-5小时都可以。有个别酶需要55度。注意,酶别加多了,甘油浓度过高影响酶的活性。反应体系中甘油浓度要小于1%,而酶是储存在50%甘油中。
为什么
酶切
实验要求加样迅速,要在冰上进行操作
答:
连接前最好将水、插入片段和载体混合好以后置于45度水浴5min,马上置于冰上冷却,再加入buffer和ligase。双
酶切时间
及其体系:需要强调的是很多人建议酶切过夜,其实完全没有必要,我一般酶切3个小时,其实1个小时已经足够。应用大体系,如100微升。纯化问题:纯化PCR产物割胶还是柱式,我推荐柱式,因为...
酶切
技术技术问题
答:
在酶切过程中,一般3小时的
酶切时间
足够,无需过夜。使用大体系,如100微升,可以提高效率。对于纯化,柱式纯化优于割胶,因为它能更有效地去除大块杂质,且TAKARA的柱式试剂盒有良好的祛除引物和酶切产物的能力。酶量的控制也很重要,例如TAKARA的酶,1单位定义为1小时内完全分解1μgλDNA。PCR产物和...
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