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选择转化受体细胞的原则
选择受体细胞的
一般
原则
是什么
答:
选择受体细胞的一般原则:
①易于接纳外源DNA;②无特异的内源核酸内切酶;③载体复制、扩增不受阻;④与载体有互补性.根据不同的需求
,还应考虑:①表达载体所含的选择性标记与受体细胞基因型是否匹配;②遗传稳定性高,易于进行扩大培养;③受体细胞内源蛋白水解酶基因确失或蛋白酶含量低,利于外源基因蛋白...
选择受体细胞的
一般
原则
是什么
答:
点拨:细胞传至10~50代后,细胞核型可能发生变化,核移植时,一般选用传代10代以内的细胞,以保证供核的稳定性.而受体细胞一般选用处于减数第二次分裂时期的卵母细胞,因为该期细胞内促进个体发育的活性物质的活性高,是作为
受体细胞的
最佳时期细胞.
影响淋巴
细胞转化的
因素
有哪些
?
答:
⑴、受体细胞转化的受体细胞一般是限制-修饰系统缺陷的突变株,即不含限制性内切酶和甲基化酶的突变株
,它可容忍外源DNA分子进入体内并稳定地遗传给后代。另外还应根据载体的性质及实验的目的选择合适的宿主。此外,受体细胞生长状态和密度也很重要。不要使用经过多次转接或储存于4℃的培养菌。细胞生长密度...
DNA重组体是怎样引入
受体细胞的
?
答:
选定的受体细胞必须具备使外源DNA进行复制的能力
,而且还应该能够表达由导入的重组体分子所提供的某种表型特征,这样才有利于转化子细胞的选择与鉴定。把重组载体DNA分子引入受体细胞的方法很多,如常用的重组质粒大肠杆菌热激转化法、病毒DNA感染法、生物介导法等。在理想情况下,上述重组载体进入受体细胞后,...
重组DNA分子导入
受体细胞的
主要方法有哪些
答:
(1)农杆菌转化法:农杆菌是土壤中的一种微生物
,在自然条件下感染双子叶植物和裸子植物,对大多数单子叶植物没有感染能力。农杆菌进入植物细胞后,其Ti质粒上的T-DNA会转移到受体细胞染色体的DNA上,目的基因进入植物细胞。(2)花粉管通道法:在授粉后向子房注射含目的基因的DNA溶液,利用植物在开花...
质粒和目的基因能够成功拼接的基础是为什么是DNA分子结构相同?
答:
相同的分子结构就可以进行碱基互补配对,就可以直接连接。
作为基因工程
受体细胞的
原因是什么
答:
受体细胞
是指在
转化
和转导(感染)中接受外源基因的
宿主细胞
。作为基因工程的受体细胞必须具备下面的特点:(1)具有接受外源DNA的能力;(2)一般应为限制酶缺陷型(或限制与修饰系统均缺陷);(3)一般应为DNA重组缺陷型;(4)不适于在人体内或在非培养条件下生存;(5)它的DNA不易转移。基因工程...
为什么出现杂交带就会证明目旳基因导入
受体细胞
答:
根据碱基互补
原则
,可以互补的dna分子才会出现杂交带!
基因治疗?
答:
选择
靶
细胞的原则
是: ①必须较坚固,足以耐受处理,并易于由人体分离又便于输回体内; ②具有增殖优势,生命周期长,能存活几月至几年,最后可延续至病人的整个生命期; ③易于受外源遗传物质的
转化
; ④在选用反转录病毒载体时,目的基因表达最好具有组织特异性的细胞。目前使用得较多的是骨髓干细胞、皮肤成纤维细胞、肝...
重组dna技术包括哪些主要步骤
答:
重组DNA技术主要包括四个步骤:提取目的基因、目的基因与运载体结合、将目的基因导入
受体细胞
、目的基因的检测和表达。1、提取目的基因 获取目的基因主要有两条途径:一条是从供体
细胞的
DNA中直接分离基因;另一条是人工合成基因。直接分离基因最常用的方法是“鸟枪法”,又叫“散弹射击法”。2、目的基因与...
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