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等恒温扩增dna
RAA-重组酶介导等温核酸
扩增
技术原理
答:
RAA,全称为重组酶介导等温核酸
扩增
技术,是一种革命性的分子生物学工具,它巧妙地运用了重组酶、单链结合蛋白和
DNA
聚合酶的协同作用,在理想的37℃环境中完成高效扩增。这个过程可以被想象为一场精密的接力赛:首先,复合体由重组酶、单链结合蛋白和引物组成,它们如同寻宝者般在双链DNA上寻找匹配的引物...
等温
扩增
技术和定量pcr技术哪种好
答:
评价一个技术好坏,主要是看快速性、特异性、灵敏性。与常规PCR相比,不需要模板的热变性、温度循环、电泳及紫外观察等过程。环介导等温
扩增
法是一种全新的核酸扩增方法,具有简单、快速、特异性强的特点。该技术在灵敏度、特异性和检测范围等指标上能媲美甚至优于PCR技术,不依赖任何专门的仪器设备实现现...
PCR与LAMP的关系PCR和LAMP都属于基因
扩增
技术吗
答:
LAMP,环介导等温扩增法,英文名称为loop-mediatedisothermal amplification,是一种新型的核酸扩增方法,其特点是针对靶基因的6个区域设计4种特异引物,在链置换
DNA
聚合酶(Bst DNA polymerase)的作用下,60--65℃
恒温扩增
,15-60分钟左右即可实现10^9~10^10倍的核酸扩增 PCR技术的基本原理类似于DNA的天然复制...
恒温
PCR技术检测转基因有哪些优点?
答:
恒温
PCR一种新式恒温核酸
扩增
方法,其原理是采用能特异识别靶序列上6个位点的4条引物及一种具有链置换活性的
DNA
聚合酶,反应全过程恒定63℃,不到1h的时间里进行核酸的指数级扩增,其扩增效率可达到109个~ 1010个拷贝数量级。在扩增反应中产生茎-环结构,保证引物与其杂交启动新一轮核酸合成。配合恒温荧...
SAT技术(实时荧光核酸
恒温扩增
检测技术)有人听说过吗?
答:
实时荧光核酸
恒温扩增
检测技术(Simultaneous Amplification and Testing,简称SAT)是将新一代的核酸恒温扩增技术和实时荧光检测技术相结合的一种新型核酸检测技术。该技术具有高灵敏度、高特异性、低污染、反应稳定等优点。该技术作为新一代的核酸扩增检测技术已经广泛的应用到病原体检测,血液病毒筛查,环境微...
核酸诊断的常见技术
答:
基因诊断的主要技术有核酸分子杂交、聚合酶链反应、
恒温扩增
、基因测序和生物芯片技术。 1.1 原理: 具有一定互补序列和核苷酸单链在液相或固相中按碱基互补配对原则缔合成异质双链的过程,称为核酸分子杂交。杂交的双方是待测核酸序列和探针序列。应用该技术可对特定
DNA
或RNA序列进行定性或定量检测。1.2 ...
现在文献上说LAMP
恒温扩增
技术的模板不需要预变性,是什么原因呢,如果是...
答:
主要是该方法使用了Bst酶,双链的
DNA
有一个特性,就是在65度时双链之间的结合较为松散,称之为动态平衡状态,所以不需要预变性使双链解开,而Bst酶在65度时的活性是最高的,这样LAMP反应就能正常进行了
基因
扩增
反应循环时温度变化和反应是什么
答:
1.
DNA
变性(90℃-96℃):双链DNA模板在热作用下, 氢键断裂,形成单链DNA 2.退火(25℃-65℃):系统温度降低,引物与DNA模板结合,形成局部双链。 3.延伸(70℃-75℃):在Taq酶(在72℃左右,活性最佳)的作用下,以dNTP为原料,从引物的5′端→3′端延伸,合成与模板互补的DNA链 ...
常用的转基因检测方法有哪些?
答:
常用的转基因方法包括农杆菌转化法、基因枪转化法和显微注射法3种。
基因
扩增
的注意事项有哪些
答:
2、样品制备区:主要进行样品的保存、核酸(RNA、DNA)提取、贮存及其加入至扩增反应管和测定DNA的合成。本区主要设备有冰箱、生物安全柜、离心机、加样器、振荡器、
恒温
水浴等。本区的压力梯度要求为:相对于邻近区域为正压,以避免从邻近区进入本区的气溶胶污染。3、扩增区:主要进行
DNA扩增
。此外,已...
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