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琼脂糖凝胶的配置用量
凝胶
色谱法介绍
答:
交联葡聚糖凝胶的种类有G-10,G-15,G-25,G-50,G-75,G-100,G-150,和G-200
。因此,“G”反映,凝胶的交联程度,膨胀程度及分部范围。(2)SephadexLH-20,是SephadexG-25的羧丙基衍生物,能溶于水及亲脂溶剂,用于分离不溶于水的物质。(3)琼脂糖凝胶:商品名很多,常见的有,Sepharose...
琼脂糖凝胶
电泳具体操作步骤是
什么
?需要注意什么事项?
答:
对于琼脂糖凝胶电泳,
浓度通常在0.5~2%之间
,低浓度的用来进行大片段核酸的电泳,高浓度的用来进行小片段分析。低浓度胶易碎,小心操作和使用质量好的琼脂糖是解决办法。3、缓冲液 常用的缓冲液有TAE和TBE,而TBE比TAE有着更好的缓冲能力。电泳时使用新制的缓冲液可以明显提高电泳效果。4、电压和温度 ...
LB培养基中用的是
琼脂糖
还是琼脂,两者
有什么
区别?
答:
琼脂的用量一般在4—10/1之间
。新买来的琼脂要先试一下它的凝固能力,一般只要它能稳定地凝固住就不要多加。通常培养室温度较低时可适当少放一点,温度高时要多放一点。琼脂以颜色浅,透明度好,洁净的为上品。近来有些厂家生产琼脂粉,它比条状的使用更方便。同一厂家的产品,往往粉状的比条状的用量...
DNA
琼脂糖凝胶
电泳出现拖尾的原因是
什么
答:
对策:①减少Taq酶的量,或调换另一来源的酶.②减少dNTP的浓度.③适当降低Mg2+浓度.④增加模板量,减少引物的用量 ,减少循环次数,提高退火温度.2、电泳体系的问题:(1)电泳缓冲液TAE或者TBE的污染,建议更换缓冲液.(2)上样时样品漂了,建议增加上样缓冲液
的用量
,以及小心加样.(3)电压太高.(4...
为什么用于培养基的
琼脂凝胶
强度高
答:
培养基的合适凝胶强度一般在400~700 g/cm2范围之间
,具体不同品种培养基的合适凝胶强度则需要大量实验以确定。过少的加入琼脂量会造成培养基不易凝固,划线接种细菌时易划破;过多的加入琼脂量不仅造成了不必要的浪费而且还会造成培养基过硬,直接影响微生物对营养物质的吸收利用。酸性条件下琼脂易降解,在...
DNA的
琼脂糖凝胶
电泳的应用和发展举例。要详细一点的。谢谢了。很急啊...
答:
应用:1、DNA的制备。⑴ 适合分离大片段DNA。
琼脂糖凝胶
约可区分相差100bp的DNA片段,其分辨率虽比聚丙烯酰胺凝胶低,但它制备容易,分离范围广,尤其适于分离大片段DNA。普通琼脂糖凝胶分离DNA的范围为0.2-20kb,利用脉冲电泳,可分离高达10^7bp的DNA片段。在青贮饲料总DNA的提取实验中,是通过琼脂糖凝胶...
DNA测序技术的操作
答:
(1) DNA的浓度和纯度必须经过
琼脂糖凝胶
电泳或荧光法测定, 样品应与已知量DNA一起电泳。(2) 分光光度法对于很多DNA提取物包括质粒小量制备来说,并不能给出一个可信的DNA浓度估计,混杂的染色体DNA、蛋白、RNA、有机物及无机化合物均可能有260 nm光吸收。因此,分光光度法常常错误地高估DNA浓度。 (3) DNA制备...
载
脂
蛋白AⅠ简介
答:
①浇板:每板用10g/L
琼脂糖
10ml,沸水浴中融化,混匀,冷至50~55℃时加入apoAⅠ抗血清50μl,apoB抗血清8μl(
用量
视抗血清效价而定),迅速混匀后倒在预置在水平台上的玻璃板上,冷后放在4℃,20min后打孔,孔在板的阴极端,孔径3mm,孔间距至少5mm,孔容量5μl。把板放入电泳槽,用滤纸搭桥。 ②稀释抗原:用0.1...
琼脂糖凝胶
电泳拖尾了怎么办?
答:
(2)上样时样品漂了,建议增加上样缓冲液的
用量
,以及小心加样。(3)电压太高:适当降低电压 (4)根据核酸片断大小,适当把加大
凝胶
浓度。凝胶浓度的选择取决于DNA分子的大小。分离小于0.5kb的DNA片段所需胶浓度是1.2-1.5%,分离大于10kb的DNA分子所需胶浓度为0.3-0.7%, DNA片段大小间于两者...
PCR产物进行
凝胶
电泳电压、时间各是多少好 还有溴酚蓝的量 已知PCR产 ...
答:
电压一般130-140v,时间要依据你的PCR产物大小来确定了,一般500bp-5k之间的PCR产物可用20-30min即可分离开了。溴酚蓝一般加在上样缓冲液中,量没有严格限制,只要有颜色即可,它只是起到标记前沿的作用,溴酚蓝的位置大约相当于500bp左右的DNA片段的迁移速率(在0.8的
琼脂糖凝胶
中)。一般商品化的...
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