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核酸浓度与纯度的检测方法
检测核酸纯度方法
答:
大于0.25μg/ml的核酸溶液,对浓度更小的样品,
可采用荧光分光光度法
。试剂与仪器: 提取的质粒DNA,紫外分光光度仪。操作步骤:1) 分光光度计先用水在260nm和280nm两个波长下校零。2) 取质粒DNA样品2μl,用水稀释100倍,转入分光光度计的石英比色杯中。3) 在260nm和280nm分别读出样品光密...
简述如何
通过分光光度法
判断DNA的
纯度
。
答:
【答案】:分光光度法不但能确定核酸浓度
,还可通过测定在260nm和280nm的紫外光吸收值的比值(A260/A280)估计核酸的纯度。纯净的DNA制品的A260/A280为1.8。DNA样品A260/A280为1.8~2.0时,表明样品纯度已达到要求。DNA样品A260/A280比值低于1.6时,表明有蛋白质或苯酚污染,应用苯酚-氯仿抽提,...
通常用来鉴定
核酸
样品
纯度的
指标是( )。
答:
A项,
实验中常利用260nm与280nm的吸光度比值(A260/A280)还可以判断从生物样品中提取的核酸样品的纯度
。DNA纯品的A260/A280的比值应为1.8;而RNA纯品的A260/A280的比值应为2.0。BD两项,DNA的Tm值与DNA长短以及碱基的GC含量相关。GC的含量越高,Tm值越高;离子强度越高,Tm值也越高。Tm值...
如何判定
核酸
样品的
纯度
答:
① 如果是看DNA或者RNA的纯度,
可以通过OD260/OD280比值来衡量,DNA OD260/OD280比值在1.8-2.0;RNA >2.0
。如果比值<1.8,说明有蛋白质残留。② 如果是多个核酸样品混合物,则通过电泳来看目的条带在混合物中比例。百度教育团队【海纳百川团】为您解答。 感谢您的采纳 O(∩_∩)O 。如有疑问,欢迎追问。本回答由...
核酸的纯度
是什么意思呀
答:
检测核酸纯度的方法有很多种,
其中比较常用的有光谱法和凝胶电泳法
。光谱法是通过分析核酸溶液的光谱,确定其中的核酸含量和纯度,其优点是无需破坏样本,对小样本或微量核酸溶液检测效果较好;凝胶电泳法是通过将样品在凝胶中进行分离和检测,确定其中核酸的含量和分子量,其优点是适用于大样本体积和高浓度...
如何测量RNA的
纯度和含量
答:
RNA
纯度
:RNA在纯化过程中容易受到DNA、蛋白质及有机溶剂的影响,这些残存物将会影响以后的操作。光谱分析(NANODROP)利用物质对不同波长光的吸收度的不同,可以鉴别出溶液纯度及
浓度
。组成结构 RNA和DNA一样,也是由各种核苷酸通过3′,5′-磷酸二酯键连接构成的多核苷酸链,但与DNA有一系列差异。在...
a260/a280是什么意思
答:
a260/a280是测
核酸浓度和纯度
用的。用紫外分光光度计测量样品时,不同成分的样品会有不同的吸光度。260纳米(nm)是核酸的最高吸收峰的吸收波长,280nm则是蛋白和酚类的。一般用A260/A280来
检验
DNA和RNA的纯度,纯DNA的这个比值约为1.8,纯RNA约为2.0。核酸最高吸收峰的吸收波长最佳测量值的范围...
如何用分光光度计测量
核酸的浓度
答:
除了
核酸浓度
,分光光度计同时显示几个非常重要的比值表示样品的
纯度
,如A260/A280的比值,用于评估样品的纯度,因为蛋白的吸收峰是280nm。纯净的样品,比值大于1.8(DNA)或者2.0(RNA)。如果比值低于1.8 或者2.0,表示存在蛋白质或者酚类物质的影响。A230表示样品中存在一些污染物,如碳水化合物,...
紫外吸收法为什么能
测定核酸
的
含量和纯度
?
答:
该法
测定
蛋白质的
浓度
范围为0.1—1.0mg/mL。(2)此种
方法
测量的准确度差一点的原因:由于不同蛋白质中酪氨酸和色氨酸的
含量
不同,所处的微环境也不同,所以不同蛋白质溶液在280nm的光吸收职也不同。据初步统计,浓度为1.0 mg/mL的1800种蛋白质及蛋白质亚基在280nm的吸光度在0.3—3.0...
如何使用简单的实验
方法检测
DNA
纯度
答:
3. 根据:每毫升1微克的纯DNA的OD260值= 0.020,计算所得DNA的
纯度
;每毫升1微克的纯RNA的OD260值= 0.025,计算所得RNA的纯度;并讨论纯度较低的原因和解决办法。260、320、230、280nm下的吸光度分别代表了
核酸
、背景(溶液浑浊度)、盐
浓度和
蛋白等有机物的值。一般的,只看OD260/OD280(...
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