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外源dna导入原核细胞的方法
将
外源基因导入原核细胞
或真核细胞分别有哪些
方法
?
答:
1.1
DNA直接注射法: 是目的基因导入的最简单方法
, 但注入量有限, 能够接触到的肿瘤细胞有限,故获得的肿瘤细胞
转化
率很低, 多通过肿瘤局部多点注射给药。1.2 颗粒轰击技术:将目的基因包被金属以后,利用高压发射装置, 加速包裹目的基因的金属颗粒进入细胞,从而提高肿瘤细胞的转化率。2 化学方法 即用化学...
将重组
DNA导入细胞
内有哪些
方法
?它们的原理是什么?
答:
【答案】:(1)
将重组质粒导入原核细胞称转化
,
通常用氯化钙法使大肠杆菌细胞处于感受态,从而将外源DNA导入细胞
。另一个常用方法是用脉冲高压电瞬间处理,使外源DNA高效导入细胞,称为电穿孔法。(2)将重组体DNA包装成噬菌体,使外源基因导入宿主细胞称转导,在适宜条件下使转化率提高。(3)将外源基因导入...
简述
转化
,感染,传导和转染间的区别
答:
(1)转化:含外源基因的重组质粒(载体)将外源基因直接导入原核细胞(如细菌)
。(2)
感染
:在基因转移实验中强调重组病毒载体入侵受体细胞的过程。(3)转导:通过重组病毒载体将外源基因导入真核细胞或原核细胞。(4)转染:指重组质粒载体或游离核苷酸在脂质体等介导下进入真核细胞。2、用法不同 (...
如何把
基因
转入
原核细胞
中高效表达?
答:
可以用质粒
。质粒是独立于细菌染色体之外的环状DNA,大小只有细菌染色体的百分之一左右。可以把基因剪切后通过质粒导入细胞中。进而达到转基因的目的。
转染是什么意思
答:
(1)“转化”是指将外源基因导入原核细胞的过程
,通常使用重组质粒作为载体。(2)“
感染
”是指重组病毒载体入侵受体细胞的过程,通常用于基因转移实验中。(3)“转导”是通过重组病毒载体将外源基因导入真核细胞或原核细胞的过程。(4)“转染”是指重组质粒载体或游离核苷酸在脂质体等介导下进入真核...
将
DNA 导入细胞
和微生物
答:
原核细胞
转化
是细菌与分离的DNA 重组后发生遗传基因的改变。转化通常用来扩增克隆的DNA, 另一个常见的用途是获得大量特定的蛋白质——转化了表达载体的细菌将产生大量的DNA 编码的蛋白质。细菌转化主要有两种方法。与高浓度的钙离子温育 ,导致细菌的脂膜接受外源DNA, 步骤简单快捷,几分钟就可以完成。...
目的
基因
如何与受精卵染色体
DNA
整合
答:
向原核细胞中导入外源目的基因可以通过质粒,而在真核细胞质粒虽然可以导入,但它的表达可能会出现问题,因为质粒是原核生物的DNA序列,而原核生物的DNA转录及翻译机制与真核生物有很大不同 要将外源基因导入到真核细胞的方法主要有 1、物理方法:(1)
DNA直接注射法:
最简单方法, 但注入量有限,表达...
简述
外源基因
转入受体
细胞的
途径
答:
2. 基因工程的基本操作程序,并且可以遗传至下一代、将目的基因导入受体细胞(1)
转化
的概念。(2)常用的转化方法。 ②终止子,位于基因的尾端。 ③标记基因的作用,筛选含有基因表达载体受体细胞的依据是标记基因是否表达: 1,最终获得所需的蛋白质,是RNA聚合酶识别和结合的部位。(3)基因表达载体...
基因
克隆的基本步骤有哪些
答:
如同聚物加尾,加衔接物或人工接头,PCR法
引入
酶切位点等,可以获得相应的黏末端,然后进行连接,此为修饰黏末端连接。四、
导入
受体细胞:载体
DNA分子
上具有能被原核宿主细胞识别的复制起始位点,因此可以在
原核细胞
如大肠杆菌中复制,重组载体中的目的基因随同载体一起被扩增,最终获得大量同一的重组DNA...
DNA
重组体是怎样
引入
受体
细胞的
?
答:
胰岛素基因工程就是将外源DNA导入原核细胞大肠杆菌中进行表达实现的。选定的受体细胞必须具备使外源DNA进行复制的能力,而且还应该能够表达由导入的重组体分子所提供的某种表型特征,这样才有利于
转化
子细胞的选择与鉴定。把重组载体DNA分子引入受体细胞的方法很多,如常用的重组质粒大肠杆菌热激转化法、病毒DNA...
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