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反相柱的洗脱顺序
柱
色谱
的洗脱顺序
是怎样的?
答:
洗脱能力强后出柱,正相液液分配色谱的洗脱顺序为极性弱的组分先被洗脱,极性强的组分后被洗脱
。反相分配色谱的洗脱顺序与此相反,极性强的组分先出柱,极性弱的组分后出柱。柱色谱中固定相极性大于流动相的色谱为正相色谱,相反的为反相色谱。根据相似相溶原理:混合物中在固定相中溶解度大的物质后出...
液相色谱未知样品
的洗脱顺序
怎样判断
答:
主要决定于使用色谱柱类型。
反相柱
一般使用极性溶剂做流动相,极性大的组分先流出。如果是凝胶色谱,则是大体积组分先流出。
sephadex lh20
柱
色谱
洗脱顺序
答:
sephadex lh20
柱
色谱
洗脱顺序
:色谱柱填料极性较弱,那么被分析的物质就是极性大的先出峰;如果用的是正向色谱柱(CN、NH2),色谱柱填料极性较强,那么被分析的物质就是极性小的先出峰。Sephadex LH20 洗脱溶剂因分为两类:
反相
和正相两种。用得最多的是反相溶剂洗脱,以甲醇/水系统最为常见,先用...
在液相色谱中色谱
柱
是以什么样的
顺序
分离出样品的
答:
当药物进入色谱柱时,会吸附到
柱子
上,随着流动相的流动又会被
洗脱
下来,然后又再吸附,再洗脱,最后流出来.由于药物的极性大小有区别,物质流出来
的顺序
也会有区别,在
反相
液相色谱中,组分极性越强就越先分离出,正向色谱柱则相反.
为什么色谱柱分为正相柱和
反相柱
?
答:
正相色谱柱填料极性强,洗脱顺序由弱到强;
反相色谱柱填料极性弱,洗脱顺序由强到弱
。非极性色谱柱:常是以硅胶为基质,表面键合有极性相对较弱官能团的键合相。反向色谱所使用的流动相极性较强,通常为水、缓冲液与甲醇、乙腈等的混合物。极性色谱柱:通常为硅胶(Silica)以及其他具有极性官能团胺基团,...
液相色谱法中应该怎么解释组分
的洗脱顺序
?
答:
根据你样品成分的极性来解释,同时还要看你使用的正向柱还是
反相柱
,如果用的是反向色谱柱(C8、C18等),色谱柱填料极性较弱,那么被分析的物质就是极性大的先出峰;如果用的是正向色谱柱(CN、NH2),色谱柱填料极性较强,那么被分析的物质就是极性小的先出峰。
什么是
反相
液相色谱?按极性,化合物流出
顺序
如何?
答:
正相色谱法 采用极性固定相(如聚乙二醇、氨基与腈基键合相);流动相为相对非极性的疏水性溶剂;
反相
色谱法 一般用非极性固定相(如C18、C8);流动相为水或缓冲液水互溶的有机溶剂。反相流出
顺序
:极性大的先流出,极性小的后出。
反相柱
怎么过
答:
经过等度运行后的色谱柱,有时用90~100%含量的溶剂B(双溶剂
反相
系统中
洗脱
能力较强的溶剂,如甲醇、乙晴、四氢 呋喃等)冲洗20个柱体积可以清除污染物(色谱
柱的
柱体积和空柱管体积概念不同,一根4.6x250mm
柱子的
柱体积只有2.5ml,2.1x150mm的是0.28ml)。如果使用的是缓冲盐系统,不要直接...
【求助】C18
反相柱
被污染,用异丙醇冲洗对吗?请指教!!
答:
常见的柱子再生方法可以看看
柱子的
说明书,例如,氯仿,甲醇,水,4到5倍柱体积
依次
冲洗,或者少量dmso,记得好像是这样的。用异丙醇的话,可以跟甲醇1:1
洗脱
。luxin6222(站内联系TA)如果乙腈能够洗干净,就不必考虑异丙醇。这个看柱子污染情况而定。一般异丙醇是最后采取的措施。如果真的要用,可以...
ODS色谱柱使中应注意哪些问题及其相应原因
答:
ODS为
反相柱
,流动相一般为甲醇、乙腈、水,等极性相对较大的物质,不可以用非极性物质做流动相,梯度
洗脱
时应从大水相开始,最后过渡到大有机相,实验结束后应用甲醇水或乙腈水冲洗,30-60min,如果实验中用到缓冲盐应用大水相冲洗60min以上,将盐替换出来,最后保存在85-95%的有机相中。另外,色谱...
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