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动物组织蛋白提取步骤
动物蛋白提取
和分离的方法
答:
1.取新鲜组织称重,用眼科手术刀将组织剪成小块放入试管中。2.加入动物蛋白裂解缓冲液
,并转移到匀浆器中3.在冰浴条件下用匀浆器低速匀浆至组织完全裂解4.裂解液于预冷的离心机中以12000rmp离心13分钟,上清液立即转移入新的离心管中保存。温馨提示:若短时间不用,可置于4℃保存。较长时间不用,可...
???
动物组织
用trizol浸泡后,保存,现在抽
蛋白
,有什么比较好的方法抽到...
答:
1、加入匀浆器中,冰浴条件下充分研磨。2、将组织研磨液转移至1.5ml的离心管中,于4摄氏度离心(14000rpm,10min)3、离心完毕后,吸取上层清夜转移至一新的离心管中,即为
组织蛋白
粗
提取
液。
急:请问从
动物
肌肉
组织
中
提取
全部
蛋白质
的方法和相关试剂
答:
1.破碎细胞 超声或研磨破碎细胞使蛋白质释出,将组织液离心,去除细胞膜等碎片沉淀
。2.盐析 过滤后的组织液加较高浓度的盐(一般用硫酸铵),蛋白质析出沉淀,过滤取沉淀,沉淀加水再溶解。3.透析除盐 溶液经透析去除先前所加的盐,得到的就是组织中蛋白质的混合溶液。注:所有操作需在低温下快速进行...
如何从
动物组织
中裂解得到
蛋白
答:
你好,提取总蛋白需要蛋白酶抑制剂和裂解液。
一般是1:1进行配制。用的裂解液我们是RIPA。将组织用液氮研磨碎了,然后按量加入裂解液
,细胞量在10七次方左右是100微升。冰浴裂解20分钟(间断摇动)。然后4摄氏度离心12000rpm,15分钟。吸取上清定量。根据测定量的结果将各样品总蛋白量调匀,然后等体积加...
胶原
蛋白
的
提取
分离
答:
采用超高压处理系统对原料给予高压处理一段时间,使其
组织
结构和胶原
蛋白
的三股螺旋结构发生松弛、变性,便于分离
提取
。 酸法提取是利用一定浓度的酸溶液在一定的条件下提取胶原蛋白,主要采用低离子浓度酸性条件破坏分子间盐键和希夫碱,而引起纤维膨胀、溶解,采用酸法提取的胶原蛋白通常成为酸溶性胶原蛋白。酸溶解法可将...
如何
提取
细胞膜(
动物
细胞)上的
蛋白质
答:
(一)水溶液提取法 稀盐和缓冲系统的水溶液对蛋白质稳定性好、溶解度大、是
提取蛋白质
最常用的溶剂,通常用量是原材料体积的1-5倍,提取时需要均匀的搅拌,以利于蛋白质的溶解。提取的温度要视有效成份性质而定。一方面,多数蛋白质的溶解度随着温度的升高而增大,因此,温度高利于溶解,缩短提取时间。
提纯
蛋白
的
步骤
答:
组织
和细胞破碎后,选择适当的缓冲液把所要的
蛋白提取
出来。细胞碎片等不溶物用离心或过滤的方法除去。如果所要的蛋白主要集中在某一细胞组分,如细胞核、染色体、核糖体或可溶性细胞质等,则可利用差速离心的方法将它们分开,收集该细胞组分作为下步纯化的材料。如果碰上所要蛋白是与细胞膜或膜质细胞器...
蛋白质提取
方法比较
答:
1 利用机械力将细胞破碎。常用的设备:高速
组织
捣碎机,匀浆器,研钵等。不同组织的特性来选择不同的方法,
动物
的胰肝脑一般较柔软,用普通匀浆器研磨即可,而肌及心肌组织较韧,需预先搅碎成匀浆。2.超声破碎法 1 利用震荡频率为15-25KHz的超声波在细胞液中产生的空化效应和机械效应将细胞膜破碎的...
牛血清白
蛋白
的
提取
和鉴定方法(设计性实验报告)
答:
牛血清白
蛋白
的
提取
操作
步骤
:1、盐析取离心管一支加入牛血清2mL、加入等量PBS(磷酸盐缓冲生理盐水)稀释血清,摇匀后,逐滴加入pH7.2饱和硫酸铵溶液2mL,边加边摇,充分混匀,然后静止放臵10分钟,再离心(2000r/min)10min,将上清液倾入试管中。2、取干净的比色板,在各孔内滴加一滴纳氏试剂...
核
蛋白
的
提取
方法
答:
B.
组织蛋白提取
1. 取适量组织样本剪碎,加冷PBS,用组织匀浆器匀浆至无明显肉眼可见固体(或用液氮研磨),冰上静置5分钟,小心将上清吸入另一预冷的干净离心管。2. 在4℃,500×g条件下离心2-3分钟,弃上清。3. 按照细胞蛋白的提取方法的第3
步骤
往下操作即可。上述蛋白提取物请分装后于-80℃...
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