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克隆启动子
为什么用snapgene模拟的
克隆
会与
启动子
方向相反?
答:
在 SnapGene 中使用 Restriction Cloning 模拟
克隆
时,出现
启动子
与期望方向相反的情况通常有两个可能的原因:序列方向问题:在序列编辑器中检查启动子序列(及其上下游序列)的确切方向,并确保在限制酶酶切时,断裂点恰好在整个构建的“顶部”(因此应在顶端酶切)。启动子重复:确保您正确标记了启动子,...
启动子克隆
出来但是序列不对
答:
1、
启动子
本身存在缺陷或错误。可以使用启动子克隆工具检查启动子代码,查看是否有任何错误或异常。如果有,需要修复启动子并重新运行克隆工具。2、镜像文件存在错误。需要确保使用正确的镜像文件,并检查其文件格式和完整性。
为什么
启动子
的
克隆
比基因难
答:
对外源基因的表达水平影响大。根据查询淘豆官网显示,
启动子
对外源基因的表达水平影响大,是基因工程表达载体的重要元件,因此研究启动子的
克隆
方法,对研究基因表达调控和构建表达载体至关重要。
基因克隆和
启动子克隆
是一回事么
答:
不一样,基因是基因,
启动子
是启动子,一般来源:基因来自CDNA,启动子来自DNA
克隆启动子
pcr循环数一般多少
答:
一般25。这个看你模板的浓度以及目的了。如果是鉴定,25循环就够了。如果是要纯化后连接或者测序,可以适当增加。没有规定,只要目的条带清晰可见就行,可以根据预实验来确定。过多的循环数会导致碱基错配,过少循环导致产物太少不利于测序。
如何
克隆
真核生物的
启动子
?
视频时间 05:08
怎样
克隆启动子
和测定其序列?步骤尽量说详细点
答:
如果基因组测序已经完成的话,直接可以看出来,如1L说的,设计引物,PCR就可以;如果是基因组没有完成测序,要去
克隆
一个已知基因的
启动子
:首先,你需要自己做一个genomic walking的模板(基本原理为:抽提该物种的DNA,DNA的质量必须保证无杂质,纯度、浓度高;根据物种的不同,分别用3-5种限制性内切酶...
启动子克隆
问题
答:
会有位于第一外显子和第一内含子这种情况,不会影响转录的。
启动子
可以通过形成高级结构来能活化RNA聚合酶,使之与模板DNA准确的结合并具有转录起始的特异性。至于寻找启动子的序列,你可以先查一下文献有没有报导的,如果没有,可以用启动子预测软件试试,在线的服务器有好多,你自己搜搜吧。但是预测...
根据GenBank上登录的一个基因怎么
克隆
它的
启动子
答:
首先使用该基因的全mRNA序列在网上比对(blast),选others,然后在里面选择BAC
克隆
的序列号,找到第一个外显子,选择前后4kb的序列,在软件中预测其
启动子
区。然后使用相关软件设计,提取总DNA,用引物PCR克隆这段序列即可。
...也就是如何
克隆
已知基因的
启动子
?启动子一般有多少BP?
答:
一般而言,如果是与模式生物亲缘关系较近的生物中
克隆
某基因的
启动子
,可以查询模式生物该基因的sequence viewer相关信息,这个在拟南芥数据库以及NCBI中都可以实现。相关操作内容可以参阅本论坛中关于NCBI使用方法的一些帖子。查到sequence viewer后,选取该基因5‘UTR上游2000bp的序列作为你的目的序列,然后与...
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